科技名词
免疫沉淀
immunoprecipitation
定义:经典的免疫沉淀是指可溶性抗原与其抗体产生可见沉淀反应的血清学试验。现指将标记的蛋白质与其特异性抗体的复合物用各种方法使其沉淀的技术。沉淀的标记蛋白质可进行电泳分离并依据标记物性质进行定性定量分析。
学科:生物化学与分子生物学_方法与技术_定性定量分析方法_层析技术
相关名词:抗体 抗原 蛋白质印迹法 染色质免疫沉淀
【延伸阅读】
免疫沉淀技术是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的,用于研究蛋白质相互作用或蛋白质与DNA/RNA之间相互作用的经典方法,是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法,也是用于抗原检测和纯化的最广泛使用的方法之一。
免疫沉淀反应主要用于抗原或者抗体的定性检测,其基本原理是:抗体与细胞裂解液或表达上清液中相应的靶蛋白发生特异性结合,形成可见沉淀物(免疫复合物),再利用蛋白A/G磁珠将该免疫复合物从混合物中沉淀下来,沉淀物经过洗涤后重悬于上样缓冲液中,在高温和还原剂的作用下,抗原抗体解离。
免疫沉淀技术可以与基因组技术、放射同位素技术、聚合酶链式反应、免疫印迹等实验方法相结合,用于研究较复杂的蛋白质与DNA/RNA的相互作用和定位,如染色质免疫沉淀技术、蛋白质免疫沉淀技术和放射免疫沉淀技术等。染色质免疫沉淀技术结合了抗原抗体反应的特异性和聚合酶链反应的高灵敏性,用于研究体内DNA-蛋白质相互作用,可较为真实地展现体内基因组DNA与蛋白质的结合状况,是目前研究体内染色质水平上基因转录调控的主要技术。蛋白质免疫沉淀是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础,主要用于抗原或者抗体的定性检测,是确定蛋白质在细胞内完整生理性作用的有效方法。放射免疫沉淀技术是将灵敏度极高的放射性同位素技术与高度特异性免疫化学方法相结合的检查方法,广泛应用于鼠疫的监测和检疫。