科技名词

层析

chromatography

定义：基于不同物质在流动相和固定相之间的分配系数不同而将混合组分分离的技术。当流动相（液体或气体）流经固定相（多孔的固体或覆盖在固体支持物上的液体）时，各组分因沿固定相移动的速度不同而分离。该技术可用于微量样品的分析和大量样品的纯化制备。

学科：生物化学与分子生物学_方法与技术

相关名词：色谱法 纯化 过滤

【延伸阅读】

层析也称色谱法。基于被分离物质分子在两相（一为固定相，一为流动相）中分配系数的微小差别进行分离，是一种多级分离技术。当两相做相对移动时，被测物质在两相之间进行反复多次分离，使原来微小的分配差异进一步扩大，使各个组分分离。这一分离方法效率高、效果好，能将各种性质极相似的物质彼此分离。

层析可分为多种类型。根据移动相种类的不同，分为液体层析、气体层析两种。用作固定相的有硅胶、活性炭、氧化铝、离子交换树脂、离子交换纤维等，或是在硅藻土、纤维素等无活性的载体上附着适当的液体，也可使用其他物质。

层析是蛋白质分离纯化的重要手段之一。一般而言，待分离蛋白质溶液（流动相）经过一个固态物质（固定相）时，根据溶液中待分离的蛋白质颗粒大小、电荷多少以及亲和力如何等，使待分离的蛋白质溶液在两相中反复分配，并以不同速度流经固定相而达到分离蛋白质的目的。

在蛋白质分离纯化中，应用最广的层析法是离子交换层析和凝胶过滤。

一、离子交换层析。蛋白质和氨基酸一样，是两性电解质，在某一特定pH时，各蛋白质的电荷量以及性质不同，可以通过离子交换层析得以分离。

二、凝胶过滤。又称分子筛层析。层析柱内填满带有小孔的颗粒，一般由葡聚糖制成。蛋白质溶液加于柱之顶部，任其往下渗漏，小分子蛋白质进入孔内，因而在柱中滞留时间较长，大分子蛋白质不能进入孔内而径直流出，因此不同大小的蛋白质得以分离。（延伸阅读作者：河北师范大学化学与材料科学学院教师于博荣博士）